Procedura barwienia metodą Grama w badaniach i laboratoriach

Barwienie metodą Grama to procedura mikrobiologiczna, która klasyfikuje bakterie na podstawie budowy fizycznej i chemicznej ich zewnętrznej powierzchni. Odbywa się to tylko za pomocą szkiełka, mikroskopu i plam. Ta procedura jest powszechnie stosowana do wykrywania i identyfikacji bakterii zarówno w laboratoriach badawczych, jak i klinicznych.KątKąt

Gram-dodatnie i Gram-ujemne

Bakterie są luźno podzielone na dwa typy, Gram-dodatnie i Gram-ujemne.

• Bakterie Gram-dodatnie mają grubą warstwę złożoną z polimerów cząsteczek białkowo-cukrowych zwanych peptydoglikanem. Barwienie metodą Grama warstwy peptydoglikanu (czyli ściany komórkowej) substancją chemiczną o nazwie fiolet krystaliczny powoduje purpurowe zabarwienie bakterii Gram-dodatnich. Dodatek acetonu lub alkoholu odwadnia bakterie, sprawiając, że zachowują fioletowy kolor.

• Bakterie Gram-ujemne posiadają dodatkową błonę zewnętrzną, której właściwości są odporne na odwodnienie acetonem/alkoholem i powodują utratę fioletu krystalicznego. Barwnik kontrastowy złożony z fuksyny zabarwia te bakterie na czerwono lub różowo.

Test polega na przyjrzeniu się bakteriom na szkiełku pod mikroskopem. Bakterie można zobaczyć pod mikroskopem, jeśli są zabarwione. Bakterie te można zebrać w próbkach, takich jak mocz, plwocina i krew. Próbki te służą do określenia, czy bakterie znajdują się w określonej części ciała. Infekcje są często zlokalizowane w jednej części ciała, takiej jak pęcherz, płuca, a nawet kość, woreczek żółciowy, skóra. Niektóre infekcje są bardziej uogólnione i rozprzestrzeniają się we krwi.

Bakterie barwiące na fioletowo są gram-dodatnie; te, które zabarwiają się na różowo, są gram-ujemne. To prosty sposób na poznanie ważnych informacji. Mówi nam, jaki rodzaj zewnętrznej warstwy ochronnej ma bakteria. Pomaga to lekarzom zdecydować, które antybiotyki zastosować i które bakterie są odpowiedzialne za infekcję — ponieważ oczekuje się, że niektóre bakterie będą zachowywać się inaczej niż inne.

Niektóre bakterie są gram-dodatnie, takie jak Staph Aureus (w tym MRSA) i bakterie Strep. Inne bakterie są Gram-ujemne, takie jak Salmonella, Shigella i wiele innych bakterii. Bakterie (rodzaj) wywołujące rzeżączkę i przerażającą postać bakteryjnego zapalenia opon mózgowych, Meninogococcus, są Gram-ujemne. Niektóre bakterie nie są tak dobrze scharakteryzowane przez status grama, ale jest to przydatne w przypadku wielu rodzajów bakterii.

Rodzaje infekcji często mogą być spowodowane przez infekcje Gram-ujemne lub Gram-dodatnie, ale może być bardziej prawdopodobne, że są spowodowane przez jeden lub drugi rodzaj. Zapalenie płuc może być spowodowane jednym i drugim, ale wiele osób cierpi na infekcje Gram-dodatnie wywoływane przez bakterie Strep. Infekcje dróg moczowych są często powodowane przez infekcje Gram-ujemne. Istnieje wiele innych rodzajów infekcji, które mogą być głównie Gram-dodatnie lub Gram-ujemne.

Dlaczego jest to ważne

Wiedza, czy nieznany typ bakterii jest gram-ujemny czy dodatni, może pomóc w identyfikacji bakterii. Lekarze często muszą odgadnąć, jakie infekcje ma pacjent. Często muszą leczyć empirycznie, jak mówimy, nie wiedząc dokładnie, co powoduje infekcję i który antybiotyk jest najlepszy. Znajomość statusu plam gramowych pomaga.

Różne bakterie reagują na różne antybiotyki. W szczególności bakterie Gram-dodatnie i Gram-ujemne reagują inaczej na różne antybiotyki. Wiedza o tym, czy bakterie są bakteriami gram-ujemnymi czy dodatnimi, może pomóc w podjęciu decyzji, które antybiotyki najprawdopodobniej będą działać.

Barwienie metodą Grama można przeprowadzić w laboratoriach bez dużych nakładów. Wystarczy mikroskop, szkiełka, barwniki i ktoś, kto wie, jak zrobić plamę gramową.